Цифровая ПЦР: в чем преимущество?

Почему цифровая ПЦР в какой-то мере проще для получения количественного результата, чем проведение ПЦР в реальном времени? Рассказывает заведующая молекулярно-генетическим отделом в лаборатории “ПОИСК” Дарья Крылова. Количество ДНК и РНК можно считать с помощью обычного анализатора, который предназначен для проведения ПЦР в реальном времени. Но это не прямой подсчет и немного сложнее, чем цифровая ПЦР. 👇 При измерении количества нуклеиновых кислот на обычном анализаторе нам придется отталкиваться от контроля с известной концентрацией, т.е., построить калибровочную кривую, а также при таких исследованиях эффективность ПЦР должна быть не менее 85%. При этом количество, которое мы получим, будет относительным. Цифровая же ПЦР позволяет в некоторых случаях получить в результате абсолютное количество без сравнения. 👉 Например, если мы говорим о вирусной нагрузке, то при использовании цифровой ПЦР нам не нужно привязываться к эталону, к заранее разведенному контролю в разных концентрациях. Так мы экономим и время, и реагенты. А вот если мы говорим о наследственных заболеваниях, которые обусловлены увеличением копий аллелей, то даже при наличии цифровой ПЦР мы всё равно возьмём какой-то эталон: последовательности ДНК, присутствующие в геноме животного в количестве 2 копий. Таким образом, мы посчитаем количество копий аллеля гена. Но даже такое исследование гораздо проще провести с помощью цифровой ПЦР, чем на анализаторе для ПЦР в реальном времени, поскольку мы автоматически получаем количественный результат, а использование традиционной ПЦР в реальном времени подразумевает, кроме всего прочего, использование формул для получения окончательного количественного результата.