Кластеризация и эволюция функции распределения рассеяния в описании кинетики начальной фазы агрегации тромбоцитов

Одной из наиболее важных биомедицинских задач в гематологической сфере исследований является задача нахождения констант скорости кинетических реакций агрегации тромбоцитов. Самой распространенной моделью процесса является уравнение коагуляции Смолуховского. «Золотой стандарт» диагностики гемостаза светопропускная агрегометрия хоть и широко распространён в медицинских анализах, однако он не применим для построения модели агрегации тромбоцитов, т.к. определение тромбоцитарного вклада в оптическую плотность анализируемой обогащенной тромбоцитами плазмы является вычислительно сложной задачей. Для решения можно использовать метод анализа одиночных частиц, основанный на анализе функций распределения рассеяния, разрешенных по полярному углу – 4Пи сканирующая проточная цитометрия. Итогом исследования стал разработанный метод автоматического гейтирования для разделения частиц на субпопуляции: тромбоциты, калибровочные латексные микросферы и неразмеченные частицы. По размеченным данным удалось определить кинетику изменения количества тромбоцитов в зависимости от времени агрегации. Сравнение результатов агрегометрии и цитометрии показали, что изменение числа тромбоцитов происходит до значительного осветления в анализируемой агрегирующей плазме. Одновременно с уменьшением количества тромбоцитов в анализируемой пробе происходит увеличение средней интенсивности рассеяния у размеченных тромбоцитов и увеличении доли частиц с малым Sforw и Sback. Предположительно, это связано с регистрацией сигналов светорассеяния мелких агрегатов тромбоцитов и увеличения доли мелких частиц в пробе в следствие агрегации тромбоцитов. Автоматизация с использованием кластеризации позволила исключить человеческий фактор при проведении исследования. Разработанный метод на основе кластеризации позволяет выделить целевые тромбоциты из данных 4Пи сканирующей проточной цитометрии. Полученные результаты гейтирования позволили зарегистрировать кинетику агрегации тромбоцитов. В дальнейшем, анализ данных 4Пи цитометрии позволит не только регистрировать изменение числа тромбоцитов в плазме, но и разделять отдельные частицы на отдельные тромбоциты и их агрегаты. 0:00| Индикатрисы димеров: теория 2:04| Цели и задачи 2:54| Инструментальные методы исследования 4:19| Входные данные 5:09| Вычислительные методы исследования. 5:42| Результаты